Hoʻoponopono i nā pilikia o ka PCR Analyzer: Nā nīnau a me nā hopena i nīnau pinepine ʻia

ʻO nā mea kālailai polymerase chain reaction (PCR) nā mea hana pono i ka molecular biology, e ʻae ana i nā mea noiʻi e hoʻonui i ka DNA no nā noi mai ka noiʻi genetic a hiki i nā diagnostics clinical. Eia nō naʻe, e like me nā mea paʻakikī, hiki i kahi mea nānā PCR ke hālāwai me nā pilikia e pili ana i kāna hana. Hoʻopuka kēia ʻatikala i kekahi mau nīnau maʻamau e pili anaHelu PCRhoʻoponopono pilikia a hāʻawi i nā hoʻonā kūpono i nā pilikia maʻamau.

1. No ke aha i hoʻonui ʻole ai kaʻu pane PCR?

ʻO kekahi o nā pilikia maʻamau e kū nei i nā mea hoʻohana, ʻo ia ka hiki ʻole o ka hopena PCR e hoʻonui i ka DNA target. Hiki ke pili kēia i kekahi mau kumu:

ʻAʻole pololei ka hoʻolālā kumu mua: E hōʻoia i ka kikoʻī o kāu mau mea hoʻomaka no ke kaʻina pahuhopu a loaʻa ka wela hoʻoheheʻe maikaʻi loa (Tm). E hoʻohana i nā lako polokalamu no ka hoʻolālā mua ʻana e pale i ka paʻa ʻole.

ʻAʻole lawa ka DNA Template: E hōʻoia ʻoe ke hoʻohana nei ʻoe i ka nui o ka DNA template. ʻO ka liʻiliʻi e hopena i ka nāwaliwali a i ʻole ka hoʻonui ʻana.

Nā mea pale i ka hāpana: Hiki i nā mea haumia i ka hāpana ke keʻe i ka hopena PCR. E noʻonoʻo e hoʻomaʻemaʻe i kāu DNA a i ʻole ka hoʻohana ʻana i kahi ala unuhi ʻē aʻe.

Pane: E nānā i kāu hoʻolālā mua, e hoʻonui i ka manaʻo hoʻohālikelike, a e hōʻoia i ka loaʻa ʻole o kāu mea hoʻohālike.

2. No ke aha i hewa ʻole ai kaʻu huahana PCR?

Inā ʻaʻole like ka nui o kāu huahana PCR e like me ka mea i manaʻo ʻia, e hōʻike ana paha ia i kahi pilikia me nā kūlana hopena a i ʻole nā ​​​​mea hana i hoʻohana ʻia.

Hoʻonui kikoʻī ʻole: Hiki ke hana ʻia inā pili kahi kumu mua i kahi kahua i manaʻo ʻole ʻia. E nānā i ka kikoʻī o nā primers me ka hoʻohana ʻana i kahi mea hana e like me BLAST.

ʻO ka Mahana Hoʻopili hewa: Inā haʻahaʻa loa ka mahana hoʻopili, hiki ke hopena i ka paʻa ʻole kikoʻī. Hoʻonui i ka mahana annealing e ka gradient PCR.

Pane: E hōʻoia i ka kikoʻī kikoʻī a hoʻopaʻa i ka mahana annealing e hoʻomaikaʻi i ka pololei o nā huahana PCR.

3. Hōʻike kaʻu mea kālailai PCR i kahi memo hewa. he aha kaʻu e hana ai?

Hiki ke hopohopo nā memo hewa ma ka PCR analyer, akā hiki iā lākou ke hāʻawi pinepine i nā hōʻailona i nā pilikia pilikia.

Nā pilikia no ka hoʻoponopono ʻana: E hoʻopaʻa pono i ka PCR analyser. He mea koʻikoʻi ka nānā ʻana i ka mālama mau a me ka calibration no ka loaʻa ʻana o nā hopena pololei.

Pūʻulu Pūnaehana: I kekahi manawa, hiki ke hoʻopilikia nā lako polokalamu. E hoʻomaka hou i kāu kamepiula a nānā i nā mea hou o ka polokalamu.

NANA: E nānā i ka manual mea hoʻohana no ka helu kuhi hewa a hahai i nā ʻanuʻu hoʻoponopono i ʻōlelo ʻia. Hiki i ka mālama mau ke pale i nā pilikia he nui.

4. No ke aha i kūlike ʻole ai kaʻu hopena PCR?

Hiki i nā hopena PCR like ʻole ke hoʻonāukiuki no nā kumu he nui:

ʻAno Reagent: E hōʻoia i ka hou a me ka maikaʻi o nā reagents a pau, me nā enzymes, buffers, a me dNTPs. Hiki ke hoʻololi ʻia nā reagents pau a i ʻole nā ​​​​mea hoʻopōʻino.

ʻO ka hoʻoponopono ʻana i ka Thermal Cycler: Hiki ke hoʻololi i nā hoʻonohonoho wela like ʻole i ke kaʻina PCR. E nānā mau i ka calibration o ka thermal cycler.

Pane: E hoʻohana i nā reagents kiʻekiʻe a hoʻopaʻa i kāu mea hoʻokele wela i nā manawa a pau e hōʻoia i nā hopena kūlike.

5. Pehea e hoʻomaikaʻi ai i ka maikaʻi o ka hopena PCR?

ʻO ka hoʻomaikaʻi ʻana i ka maikaʻi o nā hopena PCR hiki ke alakaʻi i nā hua kiʻekiʻe a me nā hopena hilinaʻi.

E hoʻoikaika i nā kūlana hoʻololi: E hoʻāʻo me ka hoʻohana ʻana i nā ʻano ʻokoʻa o nā kumu mua, DNA template a me MgCl2. Pono paha kēlā me kēia pane PCR i nā kūlana kūikawā no ka hana maikaʻi loa.

E hoʻohana i nā enzymes hilinaʻi kiʻekiʻe: Inā koʻikoʻi ka pololei, e noʻonoʻo e hoʻohana i ka polymerase DNA kūpaʻa kiʻekiʻe e hōʻemi i nā hewa i ka wā e hoʻonui ai.

Pane: E hana i kahi hoʻokolohua hoʻokolohua e ʻike i nā kūlana maikaʻi loa no kāu hoʻonohonoho PCR kikoʻī.

Ma ka hōʻuluʻulu

Pilikia aHelu PCRhiki ke lilo i hana paʻakikī, akā ʻo ka hoʻomaopopo ʻana i nā pilikia maʻamau a me kā lākou hoʻonā hiki ke hoʻonui nui i kāu ʻike PCR. Ma ka hoʻoponopono ʻana i kēia mau pilikia maʻamau, hiki i nā mea noiʻi ke hoʻomaikaʻi i nā hopena PCR a hōʻoia i nā hopena hilinaʻi i nā noi biology molecular. ʻO ka mālama mau ʻana, ke koho akahele ʻana i nā reagents, a me ka hoʻonui ʻana i nā kūlana hoʻihoʻi he mau kī i ka holomua PCR ana.