Koʻikoʻi o ka Calibration no ka Thermal Cycler Performance

ʻO nā kaʻa uila welahe mau mea hana pono i ke kula o ka biology molecular a me ka noiʻi genetics. ʻIke pinepine ʻia nā mīkini PCR (polymerase chain reaction), pono kēia mea hana no ka hoʻonui ʻana i nā kaʻina DNA, e ʻae ana i nā ʻepekema e hana i nā ʻano hoʻokolohua like ʻole mai ka cloning a hiki i ka nānā ʻana i ka hōʻike gene. Eia nō naʻe, hilinaʻi nui ka hana o kahi kaʻa kaʻa wela i kāna calibration, no laila pono e hoʻomaopopo nā mea noiʻi i ke koʻikoʻi o kēia kaʻina hana.

ʻO ka calibration ke kaʻina hana o ka hoʻoponopono ʻana a me ka hōʻoia ʻana i ka pololei o nā ana ʻana o kahi hāmeʻa me kahi maʻamau i ʻike ʻia. No ke kaʻa kaʻa kaʻa wela, pili kēia i ka hōʻoia ʻana i ka pololei a me ka paʻa o ka hoʻonohonoho ʻana o ka mahana i ke kaʻina holo kaʻa. He mea koʻikoʻi ka pololei o ka hoʻomalu ʻana i ka wela, no ka mea, hiki i nā ʻokoʻa liʻiliʻi ke alakaʻi i nā ʻokoʻa nui i nā hopena o kahi hoʻokolohua PCR. No ka laʻana, inā ʻaʻole i loaʻa ka mahana denaturation, ʻaʻole hiki ke hoʻokaʻawale pono nā kaula DNA, e hopena i ka hoʻonui pono ʻole. Pēlā nō, inā haʻahaʻa a kiʻekiʻe paha ka mahana annealing, hiki iā ia ke alakaʻi i ka hoʻopaʻa ʻole kikoʻī a i ʻole ka pau ʻole o ka hoʻopaʻa ʻana, e hōʻemi ana i ka pono o ka hoʻokolohua.

ʻO kekahi o nā kumu nui e koʻikoʻi ai ka calibration no nā kaʻa uila wela ka hopena i ka reproducibility. Ma ka noiʻi ʻepekema, ʻo ka reproducibility ka pōhaku kihi o ka hilinaʻi. Inā ʻaʻole i calibrated pololei ʻia kahi kaʻa kaʻa wela, ʻokoʻa paha nā hopena i loaʻa mai nā hoʻokolohua like ʻole, no laila paʻakikī ke hana hou i nā ʻike noiʻi. Hiki i kēia kūlike ʻole ke alakaʻi i nā manaʻo kuhi hewa a me nā kumu waiwai pau ʻole, e hoʻololi ana i ka pono holoʻokoʻa o ka noiʻi. ʻO ka calibration maʻamau e hōʻoia i ka hana ʻana o ka thermal cycler i loko o nā ʻāpana kikoʻī, a laila e hoʻonui ai i ka hilinaʻi o kāu mau hopena.

Eia kekahi, ʻo ke koʻikoʻi o ka calibration ʻaʻole wale i ka pololei o nā hoʻonohonoho wela, akā i ka like ʻole o ka hāʻawi ʻana i ka mahana i loko o ka thermal cycler. Hiki i kahi mea hana i hoʻoponopono maikaʻi ʻia ke hāʻawi i nā mahana kūlike i nā pūnāwai a pau i loko o kahi pā multiwell. Hiki i nā ʻokoʻa o ka mahana ke alakaʻi i nā ʻokoʻa o ka nui o ka amplification, hiki ke hoʻopilikia i nā hopena a i ka hopena holoʻokoʻa o ka hoʻokolohua. Ma ka calibrating the thermal cycler, hiki i nā mea noiʻi ke hōʻoia i nā mea hoʻohālike āpau ma lalo o nā kūlana wela like, a laila e hoʻomaikaʻi ai i ka maikaʻi o ka ʻikepili.

Ma waho aʻe o ka hoʻomaikaʻi ʻana i ka pololei a me ka hoʻihoʻi hou ʻana, hiki i ka calibrating maʻamau i kāu mea hoʻokele wela ke hoʻolōʻihi i ke ola o nā mea hana. I ka wā lōʻihi, hiki i nā ʻāpana i loko o kahi kaʻa kaʻa wela ke pau a emi ʻole ka maikaʻi, e alakaʻi ana i nā hewa. Ma ka calibrating i nā mea hana maʻamau, hiki i nā mea noiʻi ke ʻike a hoʻoholo i nā pilikia ma mua o ka lilo ʻana i mau pilikia koʻikoʻi, e hōʻoiaʻiʻo ana i ka noho ʻana o ke kaʻa kaʻa wela i ka hana maikaʻi loa. ʻAʻole mālama wale kēia ʻano hana i ka calibration i nā kumukūʻai e pili ana i ka hoʻoponopono ʻana a i ʻole ka hoʻololi ʻana, akā e hōʻemi ana hoʻi i ka downtime ma ka lab.

I ka hōʻuluʻulu manaʻo, calibration onā kaʻa uila welahe mea koʻikoʻi o ka hōʻoia ʻana i kā lākou hana a me ka hilinaʻi i ka noiʻi ʻepekema. He mea koʻikoʻi ka mālama ʻana i ka mahana a me ka like ʻole i ka holomua o ka PCR a me nā hoʻokolohua ʻē aʻe e pili ana i ka wela. Ma ka hana ʻana i ka calibration maʻamau i mea nui, hiki i nā mea noiʻi ke hoʻomaikaʻi i ka reproducibility o nā hopena, mālama i ka pono o kā lākou ʻike, a hoʻolōʻihi i ke ola o kā lākou mea hana. Ke hoʻomau nei ka holomua o ka molecular biology, e hoʻomau ʻia ke koʻikoʻi o ka calibration thermal cycler i mea koʻikoʻi i ka holomua ʻepekema a me ka hana hou.