Pehea e koho ai i ke kaʻa uila wela kūpono no kāu mau pono noiʻi

ʻO nā kaʻa uila welahe mau mea hana pono no ka molecular biology a me ka noiʻi genetic. ʻIke ʻia hoʻi he mīkini PCR (polymerase chain reaction), pono kēia mea no ka hoʻonui ʻana i ka DNA, e lilo ia i pōhaku kihi o nā ʻano noi like ʻole me ka cloning, sequencing a me ka hōʻike ʻana i ke ʻano. Eia nō naʻe, nui nā koho ma ka mākeke e hiki ke koho i ke kaʻa kaʻa wela kūpono no kāu mau noiʻi noiʻi he hana paʻakikī. Eia kekahi mau mea nui e noʻonoʻo ai i ka wā e koho ai.

1. E hoʻomaopopo i kāu mau koi noiʻi

Ma mua o ka luʻu ʻana i nā kikoʻī o nā kaʻa uila wela like ʻole, he mea nui e loiloi i kāu mau pono noiʻi kikoʻī. E noʻonoʻo i ke ʻano o ka hoʻokolohua āu e hana ai. Ke hoʻohana nei ʻoe i ka PCR maʻamau, ka quantitative PCR (qPCR), a i ʻole kahi noi kiʻekiʻe? Pono paha kēlā me kēia o kēia mau noi i nā hiʻohiʻona like ʻole a me nā hiki o kahi kaʻa kaʻa wela.

2. Kaulana wela a me ka lokahi

He mea koʻikoʻi ka pae wela o ka mea hoʻokele wela. Pono ka hapa nui o nā kaʻina PCR i kahi ʻanuʻu denaturation ma kahi o 94-98°C, kahi ʻanuʻu annealing ma 50-65°C, a me kahi pae hoʻonui ma 72°C. E hōʻoia e hiki i ka mea hoʻokele wela āu e koho ai ke mālama i kēia mau wela a ua puʻunaue like ʻia ka mahana ma loko o ka module. Hiki ke hoʻopilikia i kāu noiʻi ʻana i ka like ʻole o ka mahana ma o ka hopena ʻana i nā hopena like ʻole.

3. Hoʻopololei a me ka hiki

Hele mai nā mea holo kaʻa wela ma nā ʻano ʻano modular like ʻole, me nā papa 96-well, 384-well plate, a me nā papa 1536-well. Pono ke koho ʻana i ke ʻano poloka i kāu mau pono hana. Inā ʻoe e hana ana i nā hoʻokolohua kiʻekiʻe, pono paha ʻoe i kahi ʻano poloka nui. ʻO ka mea ʻē aʻe, no nā hoʻokolohua liʻiliʻi liʻiliʻi, lawa paha kahi pā punawai 96. Eia hou, e noʻonoʻo inā makemake ʻoe i nā modula hoʻololi i nā ʻano like ʻole, no ka mea hiki ke hoʻonui i ka versatility o kāu noiʻi.

4. Ka wikiwiki a me ka pono

I loko o ka ʻimi noiʻi wikiwiki o kēia mau lā, ʻo ka manawa ka mea nui. E ʻimi i kahi kaʻa kaʻa wela me ka hiki ke hoʻomehana a me ka hoʻoluʻu. Hiki i kekahi mau hiʻohiʻona kiʻekiʻe ke hoʻopau i kahi pōʻaiapuni PCR ma lalo o 30 mau minuke, e wikiwiki ana i kāu kaʻina hana. Eia kekahi, ʻo nā hiʻohiʻona e like me ke ʻano wikiwiki a i ʻole ka hoʻoulu ʻana i ka hoʻomehana wikiwiki e hoʻonui i ka pono, e ʻae iā ʻoe e hana i nā mea hoʻohālike hou aʻe i ka manawa liʻiliʻi.

5. Mea hoʻohana a me ka lako polokalamu

He mea pono ka mea hoʻohana no ka hana pono. E ʻimi i kahi kaʻa kaʻa wela me kahi pale paʻi intuitive, nā koho hoʻonohonoho maʻalahi, a me nā protocol preset. Hiki i nā hiʻohiʻona kiʻekiʻe ke hele pū me nā polokalamu e hiki ai ke nānā i ka manawa maoli a me ka nānā ʻana i ka ʻikepili, he mea maikaʻi loa ia no nā noi qPCR. E hōʻoia i ka pono o ka lako polokalamu me kāu mau ʻōnaehana i kēia manawa a hiki ke mālama i ka hoʻopuka ʻikepili āu e makemake ai.

6. Nā Manaʻo kālā

'Oko'a loa ke kumu kū'ai o nā mea holo ka'a wela, no laila, he mea nui ka loa'a kālā ma mua o kou ho'omaka 'ana e kū'ai. ʻOiai he mea hoʻowalewale ke hele me ka koho haʻahaʻa loa, e noʻonoʻo i ka waiwai lōʻihi o ka hoʻokomo ʻana i kahi mīkini kiʻekiʻe e kūpono i kāu mau noiʻi noiʻi. E noʻonoʻo ʻaʻole wale i ke kumukūʻai kūʻai mua, akā i ke kumukūʻai o nā mea hoʻopau, mālama ʻia, a me nā hoʻonui hou.

7. Kākoʻo a me ka palapala hōʻoia

ʻO ka hope, e noʻonoʻo i ka pae o ke kākoʻo a me ka palapala hōʻoia i hāʻawi ʻia e ka mea hana. Pono e hāʻawi ka mea holo kaʻa uila hilinaʻi i kahi palapala hōʻoia piha a loaʻa ke kākoʻo o ka mea kūʻai aku no ka hoʻoponopono a me ka mālama ʻana. Mālama kēia iā ʻoe i ka manawa a me nā kumuwaiwai i ka wā lōʻihi.

i ka hopena

Ke koho ʻana i ka ponokaʻa uila welano ka mea, he hoʻoholo koʻikoʻi kāu mau noiʻi e hiki ke hoʻopilikia i ka holomua o kāu hoʻokolohua. Ma ka noʻonoʻo pono ʻana i kāu mau koi kikoʻī, ka pae wela, ke ʻano o ka module, ka wikiwiki, ka mea hoʻohana, ka waihona kālā, a me ke kākoʻo o ka mea hana, hiki iā ʻoe ke hana i kahi koho ʻike e hoʻonui ai i kāu mau noiʻi a loaʻa nā hopena hilinaʻi. ʻO ka hoʻolilo ʻana i ka manawa i kēia kaʻina koho e loaʻa ka hopena i ka maikaʻi a me ka maikaʻi o kāu hana ʻepekema.