E ʻimi i ka maʻalahi o nā mea hoʻokele wela i ka noiʻi

He mau mea hana koʻikoʻi i ka biology molecular a me ka noiʻi genetics nā mea hoʻokele wela, ʻo ia hoʻi nā mīkini PCR. Hoʻohana ʻia kēia mau mea hana e hoʻonui i ka DNA a me RNA ma o ka ʻenehana polymerase chain reaction (PCR). Eia nō naʻe, ʻaʻole i kaupalena ʻia ka versatility o nā cyclers thermal i nā noi PCR. Ma kēia ʻatikala, e ʻimi mākou i nā ʻano like ʻole o ka hoʻohana ʻana i nā kaʻa uila wela i ka noiʻi a me ko lākou koʻikoʻi i ka holomua ʻana i ka ʻike ʻepekema.

1. Hoʻonui PCR

ʻO ka hana mua o akaʻa uila welae hana i ka PCR amplification, he mea koʻikoʻi ia no nā ʻano noiʻi biology molecular. Ma ke kau ʻana i kahi laʻana DNA a i ʻole RNA i kahi ʻano o nā hoʻololi wela, hoʻolaha nā mea hoʻokele wela i ka denaturation, annealing, a me ka hoʻonui ʻana i nā kaula nucleic acid, e hopena i ka hoʻonui exponential o nā kaʻina pahuhopu. He mea koʻikoʻi kēia kaʻina hana no ka nānā ʻana i ka genetic, nā haʻawina hōʻike gene, a me ka ʻike ʻana i nā mea maʻi maʻi.

2. Ka nui o ka PCR (qPCR)

Ma waho aʻe o ka PCR maʻamau, hoʻohana ʻia nā cyclers wela no ka PCR quantitative a i ʻole qPCR, e ʻae ana i ka helu ʻana o nā pahu nucleic acid i kahi laʻana. Ma ka hoʻokomo ʻana i nā mea hoʻonaninani fluorescent a i ʻole nā ​​​​probes, hiki i nā mea hoʻokele wela ke ana i ka hōʻiliʻili ʻana o nā huahana PCR i ka manawa maoli, e hāʻawi ana i nā ʻike koʻikoʻi i nā pae hōʻike gene, viral load, a me ka hoʻololi genetic.

3. Hoʻihoʻi i ka unuhi ʻana PCR (RT-PCR)

He kuleana koʻikoʻi ka poʻe holo kaʻa wela i ka hoʻohuli ʻana i ka PCR, kahi hana e hoʻohuli ai i ka RNA i DNA hoʻohui (cDNA) no ka hoʻonui ʻana. He mea koʻikoʻi kēia ʻano hana no ke aʻo ʻana i ka hōʻike gene, nā maʻi virus RNA, a me nā ʻōnaehana splicing mRNA. He mea koʻikoʻi ke kaʻa kaʻa wela me ka mana wela kūpono i ka holomua o nā hoʻokolohua RT-PCR.

4. Kikohoʻe PCR

ʻO ka holomua o ka ʻenehana thermal cycler ua alakaʻi i ka hoʻomohala ʻana i ka PCR kikohoʻe, kahi ala koʻikoʻi loa no ka helu piha ʻana o nā waikawa nucleic. Ma ka hoʻokaʻawale ʻana i ka hopena PCR i mau kaukani o nā microreactions pākahi, hiki i nā mea hoʻokele wela ke hoʻoholo pololei i ka neʻe mua ʻana o kahi mole i hoʻopaʻa ʻia, e hana ana i ka PCR kikohoʻe i mea waiwai no ka ʻike ʻana i ka hoʻololi ʻana a me ka nānā ʻana i ka hoʻololi helu helu kope.

5. Ka hoʻomākaukau ʻana i nā hale waihona puke hoʻonohonoho o ka hanauna e hiki mai ana

He ʻāpana koʻikoʻi o nā kaʻa kaʻa wela wela o ka papa hana hoʻomākaukau hale waihona no nā noi o ka hanauna e hiki mai ana (NGS). Ma ka hoʻokō ʻana i ka PCR-based amplification o nā ʻāpana DNA, hiki i nā cyclers thermal ke kūkulu ʻana i nā hale waihona puke mai nā mea hoʻomaka liʻiliʻi, e ʻae ana i nā mea noiʻi e kālailai i ka genome, transcriptome, a i ʻole epigenome.

6. ʻEnekinia Protein a me Mutagenesis

Ma waho aʻe o ka hoʻonui ʻana i ka waikawa nucleic, hoʻohana ʻia nā cyclers thermal i ka ʻenekinia protein a me nā noiʻi mutagenesis. ʻO ka mutagenesis i kuhikuhi ʻia i ka pūnaewele, ka ʻike ʻana i ka protein, a me nā hoʻokolohua hoʻomohala kuhikuhi ʻia e hilinaʻi pinepine i nā ʻenehana ma muli o ka PCR, a ʻo nā kaʻa kaʻa wela me ka mana kūpono o ka mahana a me nā helu hoʻomehana like ʻole a me ka hoʻoluʻu ʻana he mea koʻikoʻi i ka loaʻa ʻana o nā hopena pololei a hiki ke hana hou ʻia.

7. ʻO ka hoʻāʻo ʻana i ke kaiapuni a me ka palekana meaʻai

Hoʻohana pū ʻia nā mea hoʻokele wela i ka hoʻāʻo ʻana i ke kaiapuni a me ka palekana o ka meaʻai, ʻo ia hoʻi ka ʻike ʻana i nā pathogens microbial, genetically modified organisms (GMOs) a me nā pathogens foodborne. Ke holo nei nā hoʻokolohua PCR ma luna o nā kaila wela e hiki ai ke ʻike wikiwiki a kikoʻī i nā mea haumia, e hōʻoia ana i ka palekana a me ka maikaʻi o nā meaʻai a me nā laʻana kaiapuni.

I ka hōʻuluʻulu manaʻo,nā kaʻa uila welahe mau mea hana koʻikoʻi i ka noiʻi molecular biology a me genetics, e hāʻawi ana i kahi ākea o nā noi ma mua o ka PCR amplification kuʻuna. ʻO kā lākou versatility a me ka pololei e hoʻolilo iā lākou i mea nui no nā hoʻokolohua mai ka hōʻike hōʻike genea a hiki i ka nānā ʻana i ke kaiapuni. Ke hoʻomau nei ka ʻenehana i ka holomua, ʻoi aku ka nui o ka poʻe kaʻa uila wela i ka hoʻokele ʻana i ka ʻike ʻepekema a me ka hana hou.